摘要：目的通过对滑膜成纤维细胞、滑膜巨噬细胞、肥大细胞和软骨细胞的共培养,以发现对类风湿关节炎(RA)软骨细胞分泌Ⅱ型胶原(CⅡ)影响最大的细胞类型和作用机制。方法选用C57BL/6小鼠进行胶原诱导的关节炎(CIA)造模,原代培养上述4种细胞,并进行共培养。分别加入组织蛋白酶S的特异性抑制剂(LHVS)和非特异性抑制剂(E64),加入肥大细胞的激活剂(C48/80)和膜稳定剂色甘酸二钠(DSCG)等。分别检测培养上清液及软骨细胞中组织蛋白酶S和CⅡ的表达。结果巨噬细胞和肥大细胞表达组织蛋白酶S,而滑膜成纤维细胞不表达。用肿瘤坏死因子-α(TNF-α)激活的滑膜成纤维细胞对软骨细胞CⅡ的表达无影响,巨噬细胞与软骨细胞共培养时可减少CⅡ水平[(8.79±2.79)ng/mL],软骨细胞对照组为(17.75±2.84)ng/mL,但抑制组织蛋白酶S后CⅡ恢复[LHVS组为(16.15±3.05)ng/mL,E64组为(12.55±2.64)ng/mL]。在肥大细胞与软骨细胞共培养时,激活的肥大细胞可明显减少软骨细胞分泌CⅡ[(9.82±0.42)ng/mL],共培养对照组为(26.09±3.34)ng/mL,抑制组织蛋白酶S后,软骨细胞分泌CⅡ水平恢复[分别为(30.21±2.57)ng/mL和(29.68±2.15)ng/mL]。检测各组软骨细胞中CⅡ的mRNA,未发现各组间有差异。结论巨噬细胞和肥大细胞是组织蛋白酶S的两个主要来源,组织蛋白酶S可能是破坏软骨细胞分泌的CⅡ的主要因素。

关键词：肥大细胞 巨噬细胞 软骨细胞 组织蛋白酶s 

单位：南方医科大学南方医院风湿免疫科; 广州510515; 南方医科大学珠江医院风湿免疫科; 广州510515