摘要:构建染色体BAC文库对于简化拥有庞大基因组植物的测序、物理作图和基因克隆具有重要意义。分选染色体的鉴定是整个文库构建过程的关键环节之一。本文在前人研究的基础上,分别采用荧光原位杂交(FISH)、原位PCR(C-PRINS)和PCR方法,对分选的6VS、3B和7BL染色体(臂)进行了鉴定。结果表明,这3种方法都能对流式分选染色体进行有效鉴定,其中PCR法速度最快、重复性好,但结果不具可视性、也不能鉴定分选纯度;而FISH法重复性好、结果具有可视性、能够鉴定分选纯度,但操作程序复杂耗时,受探针特异性的限制;C-PRINS法则综合了上述两种方法的优点,是最具潜力的鉴定方法,如果与液体原位杂交相结合,有可能为解决染色体分选问题开辟新的途径,但也存在重复性差、杂交信号不稳定的缺点。
关键词:小麦染色体 流式分选 pcr 原位pcr 荧光原位杂交
单位:中国农业科学院作物科学研究所分子育种系; 北京100081; 西北农林科技大学农学院; 陕西杨凌712100; 新疆农业大学农学院; 新疆乌鲁木齐830052
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