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小麦抗白粉病SSH-cDNA文库中差异基因的表达模式

吴金华; 胡银岗; 王新茹; 张宏; 王长有; 王秋英; 吉万全 作物学报 2008年第12期

摘要:为了解白粉菌诱导下抗白粉病小麦的抗病机制,构建了白粉菌接种初期的抑制性消减杂交cDNA(SSH—cDNA)文库。从中随机挑取140个阳性克隆进行测序,去除冗余序列和重复序列后,得到94条EST,利用NCBI的BLAST在线序列比对工具对GenBank的蛋白质数据库进行同源性比对及功能分类。结果表明,49个EST与已知功能蛋白同源性较高,主要涉及初级代谢(2%)、能量代谢(24%)、细胞结构(2%)、转录(2%)、蛋白质合成加工与储藏(16%)、转运(4%)、信号转导(4%)和抗病与防御(30%)。经文库比较,筛选出与病程相关蛋白基因同源的EST(Z25—1)和与谷胱甘肽硫转移酶同源的EST(Z440—1),GenBank登录号为EX567369和EX567360。以其EST序列为依据设计引物,通过RT-PCR分析它们在白粉菌诱导下的表达模式,结果该2基因表达存在明显差异。其中,Z25—1在未接种白粉菌时具有一定的表达量,白粉菌侵染后表达量开始上升,侵染72h时表达量最高,然后下降;Z440—1在未接种时也具有一定的表达量,但在接种初期表达微弱,甚至不表达,24h后表达开始上升,到72h时达最高,然后下降。本研究表明,病程相关蛋白和谷胱甘肽硫转移酶属于诱导型表达基因,且参与白粉病抗病反应,在白粉菌诱导72h时表达量最高。

关键词:小麦白粉病

单位:河北农业大学农学院; 河北保定071001; 西北农林科技大学农学院/陕西省农业分子生物学重点实验室/国家小麦改良中心杨凌分中心; 陕西杨凌712100; 陕西省农药管理检定所; 陕西西安710003

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