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小麦品种陕253γ-醇溶蛋白基因的克隆、原核表达与功能鉴定

王明霞; 高翔; 陈其皎; 董剑; 赵万春; 李艳亮; 李敏 作物学报 2011年第01期

摘要:利用设计合成的特异γ-醇溶蛋白基因引物,采用PCR方法从小麦品种陕253克隆获得一个γ-醇溶蛋白基因(GenBank登录号为GQ857626)。序列分析表明,该基因编码产物的II区由于碱基转换产生一个额外的半胱氨酸残基。构建了GQ857626的原核表达载体并转入表达菌株E.coli Rosetta gami B(DE3),IPTG诱导其成功表达。使用HisTrap HP组氨酸标记亲和层析柱纯化该基因的表达产物,并使用4 g粉质仪分析其功能。结果显示,将此纯化蛋白通过氧化还原反应整合到基础面粉后,面团的形成时间缩短,稳定时间减少,弱化度增加,导致主要的粉质指数明显下降,说明该亚基对面团流变学性质整体表现不利。

关键词:普通小麦原核表达粉质参数

单位:西北农林科技大学农学院; 陕西杨凌712100; 陕西省小麦工程技术研究中心/陕西省小麦新品种培育工程研究中心; 陕西杨凌712100

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