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小麦蛋白磷酸酶2A基因TaPP2AbB″-α启动子的克隆及表达分析

扆珩; 李昂; 刘惠民; 景蕊莲 作物学报 2016年第09期

摘要:植物蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)由结构亚基A、调节亚基B和催化亚基C组成,在应答逆境胁迫途径中发挥着重要作用。小麦基因Ta PP2Ab B″-α是调节亚基亚家族B″的成员,过量表达该基因可以促进拟南芥的根系生长及侧根发育,在盐胁迫和渗透胁迫条件下的作用更显著。本研究从小麦(Triticum aestivum L.)抗旱品种"旱选10号"基因组中克隆了Ta PP2Ab B″-α基因的启动子PB″α,序列长度为1899 bp,含有TATA-box和CAAT-box,以及响应干旱和渗透胁迫的顺式作用元件EECCRCAH1(-1058 bp至-1052 bp)、GCCCORE(-1073 bp至-1068 bp)和MYCCONSE(-1179 bp至-1174 bp)。将启动子PB″α和5种5′端缺失启动子片段与报告基因GUS(β-glucuronidase)连接后转化拟南芥,组织化学染色结果显示PB″α在植株的叶片和根中均有表达。5′端缺失分析表明缺失片段PB″α-1545和PB″α-1389具有启动子活性,活性区域位于-1389 bp和-946 bp之间。GUS定量分析结果显示,在盐和渗透胁迫条件下,PB″α、PB″α-1545和PB″α-1389的活性显著上升。本研究表明PB″α具有较强的启动子基本活性,并且在盐胁迫及渗透胁迫条件下活性显著上升,该结果为合理选用启动子改良作物提供了依据。

关键词:小麦蛋白磷酸酶2a启动子顺式作用元件gus组织化学染色

单位:山西大学生物工程学院; 山西太原030006; 农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程/中国农业科学院作物科学研究所; 北京100081

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