摘要：目的 构建小鼠Prohibitin基因真核表达质粒,在293T细胞中进行表达鉴定,为研究小鼠Prohibitin基因功能奠定基础。方法 以小鼠Prohibitin基因cDNA序列为模板,设计特定引物,应用PCR的方法扩增其编码序列全长,并将其克隆到真核表达载体pEFP-C2中,将获得的重组表达质粒转染293T细胞,应用RTPCR、Western blot方法检测其表达。结果 成功构建了pEGFP-Prohibitin真核表达质粒,将其成功转染293T细胞,pEGFP-Prohibitin转染组Prohibitin蛋白和mRNA在293T细胞的表达量比转染空载转染组明显增加。结论 成功构建了真核表达质粒pEGFP-Prohibitin,并在真核细胞表达良好,为研究小鼠Prohibitin的基因功能奠定了基础。

关键词：prohibitin 重组质粒 转染 小鼠 293t细胞 

单位：中国医科大学实验动物部; 解放军第二0二医院; 辽宁省疾病预防控制中心毒理检测所; 中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所生物治疗研究室