摘要：目的 构建含小鼠B7—1和B7—2基因的双表达载体pLXSN—mB7-1-IRES-mB7-2，并包装到PA317细胞中。方法 ①将EcoRⅠ和BamHⅠ酶切下来的pMD18-mB7—2质粒上的mB7-2基因片段克隆到含有IRES片段的MINV质粒上，得到MINV—IRES-mB7—2载体；②MunⅠ酶切载体MINV—IRES—mB7—2．末端钝化，然后BamHⅠ再酶切．得到含钝末端和BamHⅠ粘末端的IRES—mB7—2基因片段；③XhoⅠ酶切质粒pLXSN—mB7—1．末端钝化，然后BamHⅠ再酶切．形成含钝末端和BamHⅠ粘末端的开环pLXSN-mB7—1质粒，将IRES—mB7-2基因片段插入其中．得到pLXSN-mB7—1-IRES—mB7—2双表达载体；并PA317细胞包装．PCR和电镜鉴定。结果 经酶切、PCR、测序等鉴定载体构建成功，并包装到PA317细胞内。结论 成功得到了双表达载体pLXSN—mB7—1-IRES—mB7—2和包装后的PA317／mB7—1- mB7-2细胞。

关键词：载体构建 鉴定 病毒包装 

单位：山东大学齐鲁医院; 山东济南250012; 青岛市第三人民医院