摘要:目的:观察核受体( NR)4A1在不同鼠龄小鼠睾丸组织中的表达变化及NR4A1对体外小鼠睾丸间质细胞睾酮合成的影响,并探讨其机制。方法1周龄、4周龄、12周龄、12月龄雄性小鼠各6只,分别为幼年组、性发育前组、性成熟组及老年组。饲养3 d,适应环境后,各组小鼠全部脱颈处死,取双侧新鲜睾丸组织,采用real-time PCR法检测NR4A1 mRNA,Western blotting法检测NR4A1蛋白。体外培养小鼠睾丸间质细胞系MLTC-1,分别将NR4A1干涉腺病毒( Ad-siNR4A1)及空载腺病毒( Ad-CMV)转染MLTC-1。采用放射免疫法检测MLTC-1细胞培养液上清中的睾酮,real-time PCR法检测MLTC-1中的类固醇快速转运蛋白( StAR)、3β-羟类固醇脱氢酶( HSD3B) mRNA,Western blotting法检测StAR、HSD3B蛋白。结果幼年组、性发育前组、性成熟组、老年组小鼠睾丸组织中NR4A1 mRNA相对表达量以性发育前组最高,与余3组相比,P均<0.05;NR4A1蛋白相对表达量以性成熟期组最高,与余3组相比,P均<0.05。转染Ad-siNR4A1、Ad-CMV的MLTC-1中睾酮水平分别为(2.55±0.23)、(4.50±0.23)nmol/L,两者相比,P<0.05。转染Ad-siNR4A1的MLTC-1中StAR、HSD3B mRNA及其蛋白相对表达量与转染Ad-CMV的细胞相比,P均<0.05。结论不同鼠龄小鼠睾丸组织中NR4A1的表达有所差别;NR4A1可能通过调控StAR、HSD3B表达从而参与睾酮的合成。
关键词:核受体4a1 睾丸 睾丸间质细胞 睾酮 类固醇快速转运蛋白
单位:南京中医药大学男科研究所 南京210046
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