摘要：目的观察神经生长因子（NGF）诱导大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）向神经细胞分化的效果,并分析相关蛋白网络。方法将4周龄健康SD大鼠4只,脱臼处死取股骨分离BMSCs并传代。取第5代BMSCs制备细胞爬片,分为观察组和对照组两组,观察组加入3%DMSO、60 ng/m L NGF、DMEM/F12预诱导液预诱导2 h,预诱导完成后加入100 ng/m L NGF、DMEM/F12诱导液诱导48 h。对照组不加任何药物。诱导完成后倒置显微镜观察两组细胞形态变化,用免疫组化法检测两组BMSCs中的神经元特异性烯醇酶（NSE）蛋白,用实时荧光定量PCR法检测BMSCs中的NSE mRNA。采用生物信息学软件STRING10.0分析NGF在诱导BMSCs向神经细胞分化中参与的蛋白网络,并对网络系统中编码蛋白的基因进行功能富集分析。结果镜下可见观察组细胞体积增大,细胞核固缩,核质比降低,细长突起明显,部分细胞间以网络状连接。对照组细胞密度较均匀,形态以长梭形为主。诱导完成第1、2、4天,观察组NSE mRNA相对表达量分别为1.34±0.06、2.23±0.23、1.56±0.09,两组比较,P均〈0.05。观察组诱导完成第1、2天时NSE蛋白阳性细胞数分别为（35±8）、（133±6）个,对照组未检测到NSE蛋白阳性细胞,两组比较,P均〈0.05。以NGF为种子节点得到与NGF直接发生作用的105个蛋白节点,共3个中心节点,分别为NGF、神经生长因子受体和泛素C。对网络中的各个节点进行GO功能富集分析,结果富集在神经分化、神经发育及调控神经凋亡等生物学过程。NGF与Ras蛋白特定鸟嘌呤核苷酸释放因子1、脑衍生神经营养因子、生长抑制蛋白、NGF、NGFR、神经营养受体酪氨酸激酶1、神经营养受体酪氨酸激酶2、神经营养因子3、极微小蛋白激酶C、GTP结合蛋白RAC、核糖体蛋白S27A、信号传导子及转录激活子3、酪氨酸羟化酶、泛素A-52、泛素B和UBC等蛋白相互作用调控神经分化过程。模块分析结

关键词：骨髓间充质干细胞 神经生长因子 诱导分化 蛋白互作用 动物实验 

单位：河北北方学院基础医学院; 河北张家口075000