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小鼠骨髓间充质干细胞对血管内皮祖细胞分化潜能的影响

葛权虎; 吴向未; 程文哲; 万龙飞; 王小义; 赵伯文 山东医药 2017年第28期

摘要:目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)对血管内皮祖细胞(EPCs)向内皮细胞(ECs)分化的影响。方法分离、培养及扩增小鼠骨髓MSCs和EPCs。取5×10^5个EPCs接种于含5%FBS的EBM-2培养液,置于Transwel下室(对照组);取5×10^5个EPCs接种于含5%FBS的EBM-2+20 ng/m L血管内皮细胞生长因子(VEGF)的培养液,置于Transwell下室(VEGF组);取5×10^5个MSCs接种于Transwell insert膜上、5×10^5个EPCs接种于Transwell下室(共培养组),培养液同对照组。培养48 h,收集各组下室EPCs,采用RT-PCR法检测内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)和激酶插入结构域受体(KDR)mRNA表达;ELISA法检测各组细胞培养液上清VEGF含量。提取MSC条件培养基(MSCCM)及LG-DMEM基础培养基,ELISA法检测VEGF含量。取传3代EPCs,分别用LGDMEM、MSCCM、MSCCM+IgG、MSCCM+VEGF抗体的培养液培养48 h(分别设为LG-DMEM组、MSCCM组、MSCCM+IgG组、MSCCM+VEGF抗体组),收集细胞,采用RT-PCR法检测各组eNOS、KDR mRNA表达。结果共培养组eNOS、KDR mRNA相对表达量明显高于对照组和VEGF组(P〈0.05或〈0.01);共培养组、VEGF组培养液上清VEGF含量均明显高于对照组(P均〈0.01)。MSCCM中VEGF含量较LG-DMEM基础培养基明显增加(P〈0.01)。MSCCM组和MSCCM+IgG组eNOS、KDR mRNA相对表达量较LG-DMEM组、MSCCM+VEGF抗体组均明显增加(P均〈0.01)。结论小鼠骨髓MSCs可能通过旁分泌VEGF促进血管EPCs向ECs分化。

关键词:骨髓间充质干细胞血管内皮祖细胞内皮细胞细胞分化血管内皮细胞生长因子

单位:石河子大学医学院第一附属医院; 新疆石河子832008; 石河子大学医学院

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