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基于vvhA基因检测创伤弧菌实时荧光PCR方法的建立

李丹丹; 徐义刚; 邱索平; 王昱; 高会江; 高慎阳 食品与机械 2016年第09期

摘要:为建立创伤弧菌(VV)的快速检测方法,根据vvhA基因序列设计合成引物和探针,建立实时荧光PCR方法。结果显示:所建立的方法能特异扩增出VV标准阳性菌株,而对其它14种菌株没有扩增;该方法的灵敏度为15CFU/mL;稳定性和重复性试验结果表明,同一样品重复检测4次Ct值(循环阈值)的变异系数均小于2%;利用该检测方法对采集的156份样品进行检测,共计检出2份VV阳性样品,与行标法(SN/T 1870—2007)检测结果一致。该检测方法灵敏度高、特异性强,具有良好的实用性。

关键词:创伤弧菌vvha基因实时荧光定量pcr

单位:海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心; 海南海口570311; 东北农业大学动医学院; 黑龙江哈尔滨150001; 从化出入境检验检疫局; 广东从化510900; 重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心; 重庆404100; 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所牛遗传育种研究室; 北京100193; 辽宁医学院畜牧兽医学院; 辽宁锦州121001

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