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人工RNA结合骨架的可溶性表达及其与寡核苷酸链的相互作用分析

徐如飞; 徐奕倩; 陈倩倩; 蒋培蓉; 陈美雯; 蒲首丞; 孙梅好 山西农业科学 2020年第02期

摘要:为了分析ERBS与其目标寡核苷酸的相互作用,研究设计合成了对应目标寡核苷酸的ERBS基因,并进行了蛋白的原核表达、纯化以及其与目标寡核苷酸的相互作用分析。结果发现,ERBS在Escherichia coli BL21(DE3)中表达时呈现包涵体状态,而改变宿主细胞为Escherichia coli Rosetta(DE3),可极大提高其可溶性表达水平;纯化的ERBS与FAM标记的寡核苷酸互作分析发现,其解离常数为(9.76±0.62)nmol/L。试验结果可为深入研究不同ERBS与其目标寡核苷酸的相互作用奠定基础。

关键词:rna结合蛋白可溶性表达寡核苷酸相互作用

单位:浙江师范大学化学与生命科学学院; 浙江金华321004

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