摘要：【目的】揭示小鼠卵泡膜细胞成熟过程中DNA甲基转移酶（Dnmts）表达的变化,并初步探讨其可能的机制。【方法】对新生昆明白小鼠第3、5及8天（days post parturition,dpp3、dpp5和dpp8）的卵巢进行切片,经H.E染色,分别观察原始、初级、次级卵泡膜细胞的形成情况,统计各级卵泡的比例并对卵泡外缘的膜细胞进行计数;半定量PCR检测成熟膜细胞特异性表达基因CYP17A1及Dnmts转录水平在dpp3、dpp5、dpp8卵巢中的变化;免疫组化观察Dnmt1蛋白在dpp3、dpp5、dpp8小鼠卵巢中的分布情况。【结果】小鼠dpp3卵巢中的初级卵泡外缘存在＂梭形细胞＂;随出生后时间的推移,原始卵泡比例持续下降（P〈0.01）,次级卵泡比例持续升高（P〈0.01）,dpp3、dpp5初级卵泡比例无显著差异（P〉0.05）,而dpp8下降（P〈0.05）;初级卵泡周围＂梭形细胞＂数量的平均水平在dpp3和dpp5无显著差异（P〉0.05）,在dpp8上升（P〈0.05）;次级卵泡周围＂梭形细胞＂数量的平均水平在dpp3和dpp5无显著差异（P〉0.05）,在dpp8上升（P〈0.01）。CYP17A1转录水平在dpp3、dpp5极低且无显著差异（P〉0.05）,在dpp8升高（P〈0.01）;Dnmt1s转录水平在dpp3、dpp5、dpp8持续升高（P〈0.01）;Dnmt1o转录水平在dpp5升高（P〈0.05）,在dpp8下降（P〈0.01）;Dnmt3a转录水平在dpp5升高（P〈0.01）,dpp3和dpp8转录水平无显著差异（P〉0.05）。Dnmt1免疫组化显示,卵泡颗粒细胞在dpp5、dpp8卵巢中着色呈阳性,dpp3则呈阴性;同时,＂梭形细胞＂在dpp3、dpp5卵巢中着色呈阴性,dpp8则呈阳性。【结论】膜细胞成熟可能导致Dnmt3a转录水平下降。Dnmt1s转录及表达水平在膜细胞成熟前较低,分化成熟后上调从而在膜细胞增殖过程中维持新建立的甲基化模式。

关键词：dna甲基转移酶 卵泡膜细胞 成熟 小鼠 

单位：北京农学院动物科学技术学院 北京102206 中国农业大学动物医学院 北京100193