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长期缺氧对肺腺癌SPCA1细胞谷胱甘肽转移酶表达及耐药性的影响

柳永蕾; 宋现让; 王兴武; 魏玲; 李大鹏 中华结核和呼吸 2007年第02期

摘要:目的 探讨长期缺氧对SPCA1细胞谷胱甘肽转移酶(GST-π)表达的影响及耐药性的改变。方法 SPCA1细胞常氧(20%O2)和缺氧(0.5%O2)条件下作用16h后,提取RNA和蛋白,用定量RT-PCR的方法检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和GST-π mRNA的表达情况,用Western blotting法检测HIF-1α蛋白;制备细胞悬液,用流式细胞仪测定GST-π表达;通过克隆形成实验分析SPCA1细胞对阿霉素和丝裂霉素的药物敏感性。通过 RNA干扰技术下调HIF-1α表达后,分为对照组和干扰组,观察GST-π的表达。结果 设常氧组GST-π mRNA表达率为1,缺氧组为12.2。常氧组GST-π蛋白阳性表达率为(35.78±1.25)%,缺氧组为(72.13±2.11)%。与常氧组比较缺氧组HIF-1α表达明显增加。计算1%克隆存活的药物浓度,阿霉素处理细胞,常氧组浓度为(0.29±0.05)μg/ml;缺氧组浓度为(0.48±0.07)μg/ml;丝裂霉素处理细胞,常氧组浓度为(0.71±0.10)μg/ml;缺氧组浓度为(0.79±0.12)μg/ml。干扰HIF-1α后,HIF-π mRNA与对照组比较下降了70%,而GST-π mRNA稍有下降。GST-π蛋白表达常氧条件下对照组为(32.14±1.23)%,干扰组为(30.88±1.65)%;缺氧条件下对照组为(64.78±2.45)%,干扰组为(67.42±2.21)%。结论 长期缺氧可诱导SPCA1细胞HIF-1α和GST-π表达增加,对阿霉素耐药性增加,对丝裂霉素没有影响,HIF-1α和GST-π并没有直接的相关性。

关键词:肺肿瘤细胞低氧谷胱甘肽转移酶

单位:山东省肿瘤医院基础研究中心; 济南250117

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