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血小板活化因子诱导大鼠肺微血管内皮细胞Src抑制的蛋白激酶C底物基因表达

陈珊 孙耕耘 尤青海 王楠 中华危重病急救医学 2010年第03期

摘要:目的研究血小板活化因子(PAF)对大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVEC)中Src抑制的蛋白激酶C底物(SSeCKs)mRNA表达的影响及其信号转导途径。方法体外培养RPMVEC,采用细胞原位杂交技术检测不同刺激条件下RPMVEC中SSeCKsmRNA的表达变化。结果正常RPMVEC中有少量SSeCKSmRNA表达,为棕黄色细颗粒状杂交信号,分布于胞质;用10^-10、10^-9、10^-8、10^-7mol/L的PAF分别孵育RPMVEc1.5h,SSeCKSinRNA表达随其浓度增加而升高(分别为0.0549±0.0007、0.0599±0.0018、0.0690±0.0018、0.0754±0.0019),与正常对照组(O.0368±0.0037)比较差异均有统计学意义(均P〈0.05);10^-7mol/LPAF刺激RPMVEC0.5、1.5、3、6、12、24h,SSeCKS mRNA表达水平于0.5h即显著升高(0.0710±0.0015),1.5h达峰值(0.0756±0.0017),之后逐渐下降,24h时(0.0439±0.0010)仍高于正常对照组(0.0382±0.0041,均P〈0.05);10/lmol/L核转录因子-κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二巯基氨甲酸(PDTc)预处理RPMVEC1h可显著下调PAF对SSeCKSmRNA的诱导效应(0.0497±0.0032比0.0719±0.0019,P〈0.05),而蛋白激酶C(PKC)抑制剂双吲哚基顺丁烯二酰亚胺(BIM)预处理RPMVEC0.5h则不影响此效应(0.0697±0.0021比0.0719±0.0019,P〉0.05)。结论PAF呈浓度和时间依赖的方式上调RPMVEC中SSeCKS基因转录;NF-κB信号通路而非PKC参与了PAF的诱导效应。

关键词:血小板活化因子血管内皮细胞炎症src抑制的蛋白激酶c底物

单位:安徽医科大学第一附属医院呼吸内科 合肥230022

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