摘要：目的：利用AdEasy^TMXL system构建携带小鼠B7-H4基因的重组腺病毒,并鉴定其生物学活性。方法：以RT-PCR方法从C57小鼠肺组织中扩增B7-H4全长基因并克隆到T载体,然后测序鉴定。经Xhol和EcoR双酶切后接入pshuttle-CMV穿梭载体（简称PSC）,构建重组腺病毒的穿梭质粒PSC-mB7-H4,并电转化至BJ5183-AD-1感受态细菌,经筛选获得携带mB7-H4的重组腺病毒的质粒pmB7-H4/Ad。将此质粒转化人胚肾细胞（AD-293）产生复制缺陷的重组腺病毒mB7-H4/Ad。以RT-PCR及Western blot方法检测被mB7-H4/Ad感染的AD-293细胞中B7-H4 mRNA和蛋白的表达,并观察重组腺病毒感染的小鼠成纤维细胞（L929）对T细胞增殖和细胞因子表达的影响。结果：获得序列准确的mB7-H4基因并成功构建重组腺病毒表达质粒,转化AD-293细胞获得重组腺病毒;细胞生物学实验证实,该重组腺病毒具有抑制CD3单抗诱导的T淋巴细胞的增殖和细胞因子的分泌。结论：成功构建具有免疫抑制功能的mB7-H4重组腺病毒。

关键词：重组 遗传 转染 细胞增殖 细胞 

单位：浙江大学医学院免疫学研究所 浙江杭州310058