摘要：目的：构建小鼠B7-H4胞外区基因的真核表达载体，转染酵母细胞以表达mB7-H4，并检测其生物学活性。方法：以roB7-H4的重组质粒为模板，在克隆引物上加入XhoI和EcoRI酶切位点，并用PCR方法扩增得到mB7-H4胞外区的基因片段，经XhoI和EcoRI双酶切后接入酵母表达载体Ppic9上，构建成Ppic9-mg7-H4重组质粒。经双酶切和核酸测序鉴定，将该重组质粒转染至酵母细胞，用PCR、Western Blot及ELISA等方法检测重组基因的表达，并鉴定表达蛋白的生物学活性。结果：转染Ppic9-mB7-H4重组质粒的酵母细胞内表达roB7H4，诱导表达的mB7-H4能有效抑制CD3单抗活化的T淋巴细胞的增殖（相对抑制率为28．3％）和IL-2（相对抑制率为68．8％）、IL-4（相对抑制率为78．8％）、IL-10（相对抑制率为67．6％）、IFN-γ（相对抑制率为77．7％）等细胞因子的分泌。结论：成功构建了mB7-H4真核表达系统，并获得了有生物学活性的mB7-H4分子。

关键词：遗传载体 重组蛋白质类 重组 表达 免疫抑制 

单位：浙江大学免疫学研究所 浙江杭州310058 浙江大学医学院附属第一医院 浙江杭州310003