摘要:目的利用分子克隆技术,构建微RNA(microRNA,miRNA)真核细胞载体.方法人工合成小鼠肝脏特异的微RNA(miR-122)前体基因序列,并添加酶切位点及polyT转录终止序列,经退火处理后形成双链结构,插入小干涉RNA(small interfering RNA,siRNA)表达载体pAVU6+27中,经酶切鉴定和测序证实后,构建成为miR-122真核表达载体(pAVU6+27-mir122).结果合成的基因序列完全正确并成功克隆到真核表达载体pAVU6+27上.结论 miR-122真核表达载体的构建,为进行真核细胞转染及miR-122表达的研究奠定了基础.
关键词:微rna 小干涉rna 真核表达载体
单位:第三军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室; 重庆; 400038; 第三军医大学新桥医院全军肿瘤中心; 重庆; 400037
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