摘要:目的 建立2个快速、同步检测脲原体U.Parvum和U.Urealyticum的分子信标PCR反应体系。方法 依据脲原体尿素酶B基因序列,设计分别针对U.Parvum和U.Urealyticum的特异性分子信标探针及引物,建立2个分子信标PCR反应体系。通过对脲原体标准株扩增后荧光强度的检测、分子信标S/B值测定以及进行特异性和敏感性实验,对2个体系进行评价并设定2个分子信标PCR反应体系的cutoff值。结果 U.Parvum和U.Urealyticum的分子信标S/B值均〉20。2个分子信标PCR体系能够检测U.Parvum、U.Urcalyticum标准株DNA.与其他14株细菌(包括5株有尿素酶细菌)无交叉反应,检测限度均为10拷贝/μl的重组质粒DNA。U.Parvum分子信标PCR反应体系的cutoff值为3.89.U.Urealyticum分子信标PCR反应体系的cutoff为5.32。结论 2个分子信标PCR反应体系能够快速、同步进行脲原体的分种鉴别,具有高度特异性和灵敏性。
关键词:分子信标 pcr 脲原体
单位:第三军医大学新桥医院检验科; 重庆400037; 第三军医大学新桥医院皮肤科; 重庆400037
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