摘要：目的改进小鼠中脑神经干细胞（NSCs）分离培养方法。方法分别采用机械法和酶消化法分离出生1～3d的小鼠中脑组织,在含体积分数为2%B27及20ng/mL碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的DMEM/F12培养基中进行原代和传代培养。采用巢蛋白（Nestin）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、及神经元特异性烯醇化酶（NSE）免疫细胞化学染色方法鉴定NSCs和分化细胞。结果在含bFGF及B27的DMEM/F12培养基中,可形成悬浮生长Nestin呈阳性的神经球。诱导分化的细胞可见GFAP或NSE免疫反应阳性细胞。机械法较酶消化法可获得较多的NSCs。结论在DMEM/F12培养基中添加2%B27及20ng/mL的bFGF可成功获得中脑NSCs,机械法为一种简便而有效的NSCs分离方法。

关键词：小鼠 中脑神经干细胞 分离 培养 

单位：成都医学院人体解剖与组织胚胎学教研室/发育与再生四川省重点实验室 成都610083 成都军区疾病预防控制中心 成都610021