摘要:目的 根据Pubmed报道的FOX3cDNA序列,构建神经元特异核蛋白(Neun)单克隆抗体。方法 获得FOX3cDNA序列,设计引物,PCR扩增,利用pcDNATM3.3-TOPO TA将纯化后的PCR产物插入真核表达载体中,得到FOX3蛋白,然后利用该蛋白免疫小鼠,免疫后小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,筛选后获得的杂交瘤细胞小鼠腹腔接种,收获腹腔积液后进行相关检测。结果 所获得的腹腔积液经免疫印迹检测,在(46~48)×103处显示两条带,免疫荧光检测后细胞核显示阳性信号。结论 根据FOX3cDNA序列构建的抗体与商业化的抗Neun抗体在免疫荧光和免疫印迹上表现一致,Neun与FOX3为同一基因。
关键词:神经元特异核蛋白 fox3 单克隆抗体
单位:大理大学临床医学院2012级临床医学; 云南大理671000; 大理大学附属医院病理科; 云南大理671000
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