摘要：目的构建红色毛癣菌（T.rubrum）、犬小孢子菌（M.canis）体外生物被膜模型,并观察其对特比萘芬（TERB）的敏感性。方法取红色毛癣菌、犬小孢子菌标准菌,分别接种到96孔板中,35℃静置分别孵育6、3 h,制作红色毛癣菌、犬小孢子菌体外生物被膜模型,分别于培养24、48、72、96 h时倒置显微镜观察红色毛癣菌、犬小孢子菌生物被膜形态,采用XTT法观察红色毛癣菌、犬小孢子菌生物被膜生长情况,番红精法检测培养96 h时红色毛癣菌、72 h时犬小孢子菌成熟生物被膜中的细胞外基质（ECM,以OD492值表示）,扫描电镜观察红色毛癣菌成熟生物被膜的形态。测定特比萘芬（TERB）对红色毛癣菌和犬小孢子菌的最低抑菌浓度（MIC）以及抑制50%和80%生物被膜的浓度（SMIC50、SMIC80）。结果培养48 h,两种菌株酵母相细胞与其延伸所形成的菌丝开始密集交织,培养72 h时两种菌株开始大量形成ECM并沿着菌丝形成团块聚集,可见多层膜状结构。红色毛癣菌和犬小孢子菌形成成熟生物被膜的时间分别为96、72 h。红色毛癣菌和犬小孢子菌成熟生物被膜OD492值分别为1.925±0.111、1.173±0.157。红色毛癣菌成熟生物被膜菌丝相互缠绕连接,形成精密的被膜网,菌丝清晰可见ECM。TERB对红色毛癣菌和犬小孢子菌浮游菌MIC分别是0.125、1μg/m L,而TERB对红色毛癣菌和犬小孢子菌成熟生物被膜的SMIC50、SMIC80均大于256μg/m L。结论成功构建体外红色毛癣菌和犬小孢子菌生物被膜模型。成熟的红色毛癣菌、犬小孢子菌生物被膜对TERB的敏感性低。

关键词：生物被膜 皮肤癣菌 红色毛癣菌 犬小孢子菌 

单位：广东药科大学中药学院; 广州510006; 广东省局部精准药物递药制剂工程技术研究中心; 广东药科大学实验动物中心