摘要：目的构建针对PPARγ2基因siRNA重组逆转录病毒质粒载体，为进一步基因治疗奠定基础。方法选择RNA干涉靶序列，体外合成两段互补的寡核苷酸，通过与载体连接，转化大肠杆菌，扩增、纯化得到所需质粒，通过聚合酶链反应（PCR）琼脂糖凝胶电泳鉴定及利用载体上的BamHⅠ，ClaⅠ和HindⅢ位点进行两次双酶切鉴定，重组载体应分别产生350bp，1100bp，5000bp和430bp，1100bp，5000bp六个片段，选择电泳及酶切正确的重组载体进行测序，保证siRNA的方向和序列正确。结果质粒中插入寡核苷酸的序列与设计的序列完全相符。结论成功构建了针对PPARγ2基因的siRNA重组逆转录病毒载体，为基因治疗的研究奠定了基础。

关键词：sirna 逆转录病毒载体 

单位：郑州大学第一附属医院骨科; 郑州450052; 郑州大学基础医学院