摘要：目的通过体外对胃癌细胞系的培养，探讨体外建立的CO2气腹模拟环境对胃癌细胞系SGC-7901的生长、凋亡和nm23H1、CD44v6表达的影响。为腹腔镜用于治疗消化道恶性肿瘤的安全性作初步评价，并提供相关的实验室证据。方法收集对敷生长期SGC-7901细胞，胰酶消化制成细胞悬液，根据不同实验的需要以不同的细胞浓度接种于不同的培养板，培养24h细胞贴壁后，随机分为4组：对照组、CO2气腹作用1h组、CO2气腹作用2h组、CO2气腹作用3h组，其中作为对照组的细胞始终王于细胞培养孵箱中培养，而实验组在纯CO2 14mmHg压力下培养1、2、3h，然后再置于37℃细胞孵箱内培养。48h后收获细胞用MTT法检测各组细胞的增殖情况；用流式细胞技术检测各组细胞周期分布情况和凋亡比例；RT—PCR检测各组细胞nm23H1、CD44v6 mRNA转录水平；免疫细胞化学检测各组细胞中nm23H1、CD44v6的表达情况。结果各CO2作用组经过模拟CO2气腹环境培养后，除1h作用组较对照组吸光度差异无统计学意义外，2h和3h作用组吸光度较对照组均显著上升（P〈0．05）；流式细胞仪检测各组细胞周期，对照组和各CO2作用组在培养48h后随C0：作用时间增加，增殖指数上升幅度变大，但1h作用时间组和对照组增殖指数差异无统计学意义（P〉0．05），2h和3h作用组增殖指教和对照组比较显著上升（P〈0．05）；凋亡细胞比例随CO2作用时间的延长而下降，CO2作用1h时，凋亡细胞比例与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05），1h后，凋亡细胞比例差异更显著（P〈0．01）；PCR电泳结果经凝胶成像自动分析系统分析发现实验组nm23H1-mRNA表达与对照组比较差异不具有统计学意义（P〉0．05），而CD44v6-mRNA表达2h和3h组与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）；免疫细胞化学结果显示CO2气腹可使CD44v6的表达上调，其中2

关键词：二氧化碳 气腹 胃肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡 

单位：重庆市江津区人民医院 402260 重庆市第二人民医院 402160 重庆医科大学附属第一医院 400016