摘要：为探讨反义寡聚核苷酸抑制（antisense oligodeoxynucleotides inhibition）技术在植物材料上的应用，以已知功能的NtGNL1（Nicotiana tabacum GNOM-Likel）为目标基因，寻找反义寡聚核苷酸抑制最适作用体系，并进一步分析NtGNL1的具体作用。根据目标基因mRNA序列设计反义寡聚核苷酸序列，商业合成后并将其添加到烟草胚珠、种子和花粉管离体培养的培养基中，以抑制NtGNL1的表达。结果表明，将反义寡聚核苷酸引入离体培养系统，短时间内抑制了目标基因mRNA的表达，但对胚胎发育过程的影响和种子萌发的抑制都不明显。在花粉离体萌发系统中，反义寡聚核苷酸抑制能够高效地引起目标基因mRNA的下调。对FM4-64染色的花粉管显微缩时观察发现，NtGNL1的下调能够引起囊泡分布和运输方向的改变。对花粉管膜流相关的5个基因的半定量分析也显示反义寡聚核苷酸进入花粉管后，导致3个基因的表达下调，暗示NtGNL1抑制表达会影响花粉管囊泡运输的多个节点。

关键词：反义寡聚核苷酸抑制 ntgnl1 离体培养 花粉管 囊泡运输 

单位：浙江师范大学化学与生命科学学院; 浙江金华321004; 中国科学院武汉植物园; 湖北武汉430074