摘要：目的构建pE6R4／p53／GFP重组质粒并检测其在人非小细胞肺癌H1299（p53-／-）细胞的辐射诱导表达。方法用嵌合型增强子E6R4取代pci-neo质粒的CMV增强子，将wt-p53cDNA全长序列、IRES2-EGFP报告基因片段构建于嵌合型增强子E6Ra下游，获得pE6R4／p53／GFP重组质粒，采用脂质体法将重组质粒转染人非小细胞肺癌H1299（p53-／-）细胞；采用RT-PCR方法鉴定wt-p53基因整合情况；Western blot方法检测不同辐射剂量8mV X线照射后，被转染细胞中wt-p53蛋白表达水平和持续时间。结果酶切和测序鉴定pE6R4／p53／GFP重组质粒构建正确；不同剂量8mVX线照射后，4Gy照射剂量时wt-p53基因表达最强，且持续时间延长。结论成功将辐射反应元件和正反馈基因环路技术相结合，实现了wt-p53基因的表达调控，为进一步研究非小细胞肺癌的放射-基因联合治疗奠定了基础。

关键词：基因环路 x线 非小细胞肺癌细胞 

单位：第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所; 重庆400037