目的克隆表达及纯化鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)普遍应急蛋白A(Universal stress protein A.UspA).并进行生物学预测和分析。方法查询鲍曼不动杆菌UspA基因序列,设计特异性PCR引物,以提取的鲍曼不动杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增Usp段。回收目的片段,连接到质粒pET28a.转化大肠埃希菌.37℃培养后,进行PCR扩增并测序。将重组质粒转入表...
目的构建刚地弓形虫二氢叶酸还原酶一胸苷酸合成酶(dihydrofolate reductase-thymidylate synthase,DHFR-TS)-棒状体蛋白17真核表达载体pIRES/TgDHFR-TS-TgROP17,将其转染人胚肾细胞(HEK 293T)后观察ROP17对细胞自噬的作用。方法以弓形虫速殖子总RNA为模板.逆转录PCR(RT-PCR)扩增DHFR-TS基因片段,克隆至真核表达载体pIRES的多克隆位点B,构建重组...
目的探讨白纹伊蚊不同发育期可培养共生细菌的多样性。方法培养白纹伊蚊不同发育期共生菌,根据菌落形态特征和16S rDNA序列的系统发育分析,判定分离的可培养细菌种类。结果共分离到17株细菌,隶属于4个门、8个科、14个属,其中变形菌门是优势菌群;幼虫、蛹和雌蚊中分别分离到7、8、8株细菌,且3个发育期各分离到4个特有菌株。结论白纹伊蚊体内可培...
目的利用生物信息学分析抑制抗原加工相关转运体(TAP)肽转运的伪狂犬病病毒(PRV)蛋白。方法和用在线分析软件分析HSV-1 ICP47,BoHV-1 UL49.5.HCMV US6.EBV BNLF2a.CPXV CPXV012等5种已知TAP抑制剂的理化性质、疏水性跨膜域、磷酸化修饰、亚细胞定位、信号肽、二级结构等,筛选出与几种TAP抑制剂相似的PRV蛋白,并对TAP抑制剂和筛选出的PRV蛋白进行...
目的获得口蹄疫病毒O/Ind2001株VP1蛋白的抗原信息。方法采用生物信息学方法预测VP1蛋白二级结构及其T、B淋巴细胞优势抗原表位。从GenBank中获取蛋白基因信息,通过DNAStar生物学软件、SOMPA预测蛋白质的二级结构及其理化性质;通过Phyre的同源建模服务器预测蛋白质三级结构;通过ABCpred、SYFPEITHI、IDBE等工具联合预测蛋白的T、B淋巴细胞的优...
目的验证幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Up)粘附素HpaA通过诱导T细胞分泌IL-21加剧其感染后促进胃粘膜损伤及胃癌转移的作用。方法收集56例确诊Hp感染患者临床内窥镜取得的胃粘膜,以及经根治后再次通过内窥镜取得胃粘膜,通过RT-PCR和Western blot比较其IL-21、MMP-2、MMP-9及其基因在Hp感染前后胃粘膜中的表达水平,并克隆构达、纯化粘附素HpaA...
目的探索青海地区喜马拉雅旱獭疫源地鼠疫菌基因组时空演变及其影响因素。方法采用判断抽样选取青海地区喜马拉雅旱獭疫源地自然分离到的鼠疫菌556株,对其基因组型DFR数据进行分析,采用鼠疫菌基因组分型和空间流行病学方法,绘制鼠疫菌基因组DFR时空演变专题地图,综合分析鼠疫菌基因组时空演变特征及其趋势,探索鼠疫菌基因组时空演变影响因素。结...
目的构建鼠伤寒沙门菌ydiU基因敲除株,并比较敲除株与野生株在不同生存压力条件培养基中的生长曲线,为进一步研究ydiU基因及其编码蛋白YdiU的功能奠定基础。方法以鼠伤寒沙门菌ATCC14028株作为母本PCR扩增含有ydiU基因上下游同源臂和氯霉素抗性片段的线性打靶基因,通过同源重组操作得到ydiU基因敲除株ATCC14028AydiUo分别测定敲除株与与野生株在...
目的制备猪带绦虫Ts14-3-3.6蛋白多克隆抗体,并检测Ts14-3-3.6蛋白在猪带绦虫成虫及囊尾蚴阶段的表达情况。方法合成Ts14-3-3.6基因全长,然后克隆至pCznI原核表达质粒,转化至大肠埃希菌ArctieEx-press中并诱导表达,采用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行分析,通过Ni柱亲和纯化获得Ts14-3-3.6重组蛋白。将该重组蛋白免疫新西兰兔,制备抗Ts14-...
目的构建牛型结核分枝杆菌(MB)分泌性蛋白mpb70.mpb83基因串联重组表达质粒,为进--步利用工程菌表达、获得相应抗原蛋白奠定实验基础。方法参考NCBI上公布的MB全基因组序列(EU683972.1),在利用DNAstar7.0生物信息软件分析分泌性蛋白mpb70、mpb83抗原性基础上,选择mpb70、mpb83基因编码多肽主要抗原域,利用重叠延伸PCR技术构建pGEX-6p-mpb70+mpb8...
目的了解河北地区儿童病毒性脑炎病原谱和分子进化特征。方法收集2016-2018年河北地区351例诊断为病毒性脑炎的患儿的临床资料。采用实时荧光定量PCR检测脑脊液中病原,并利用PCR扩增肠道病毒VP1基因序列片段。对柯萨奇病毒B5型测序并利用软件MEGA6.0绘制种系发生树,采用邻位相连法构建进化树。结果351例患者中,学龄前儿童247例占70.37%。其中发...
目的调查血液净化中心肺炎克雷伯菌血流感染情况,以指导临床抗感染预防与治疗。方法收集171例血液净化中心血流感染肺炎克雷伯菌患者资料。分析肺炎克雷伯菌耐药性,并对菌株进行血清分型。结果患者感染来源为肺部感染、原发性菌血症、胆道感染、泌尿系统感染、其他感染源的患者数分别为18.38.31.44和40例,分别占10.53%、22.22%、18.13%、25.73%...
目的探究慢性阻塞肺病急性发作期下呼吸道分泌物病原学,预防患者感染,指导临床疾病治疗。方法收集206例慢性阻塞肺病急性发作期下呼吸道感染患者临床资料,鉴定患者感染病原菌类型,K-B法分析耐药性,并用PCR检测耐药基因。探究患者感染发生的影响因素,并经过统计学分析差异显著性。结果患者感染革兰阴性菌81株,革兰阳性菌22株,真菌5株。革兰阴性菌...
呼吸道病毒通常引起呼吸道的相关感染,研制疫苗防治该类疾病是当前研究的热点之一。鸡痘病毒可诱导感染的宿主产生细胞、体液和粘膜免疫应答,是一种理想的疫苗载体,可表达呼吸道病毒的多种蛋白。这些呼吸道病毒包括禽流感病毒、新城疫病毒、火鸡鼻支气管肺病毒、出血性肠炎病毒和传染性支气管炎病毒等,本文综述以鸡痘病毒为传递载体的呼吸道病毒...
金黄色葡萄球菌肠毒索(Staphylococcus aureus enterotoxins,SEs)引起的食物中毒是全球性的食品安全问题之一。快速、准确的SEs检测,对于诊断及有效控制金黄色葡萄球菌引起的食物中毒具有重要意义。本文针对近年SEs检测的分子生物学方法、免疫学方法、质谱分析技术和生物传感器检测等方面的最新进展进行简要介绍。
丙型病毒肝炎(Hepatitis C virus,HCV)属于黄病赤科(Flaviviridae),丙肝病毒属(Hepacivirus,HEPV)。长期以来,该属病毒只有HCV一个种,且在自然情况下,HCV只感染人和黑猩猩,由于缺乏合适的动物模型,使HCV致病机理及疫苗的研究受到阻碍。随着DNA高通量测序技术的广泛应用,自2011年以来,HEPV中多种病毒相继被发现,该属病毒已经增加到14种:犬、马、...
病原微生物分型是根据微生物的生物学特性确定不同来源分离株之间关联性的过程。传统的分型方法曾经在感染性疾病流行病学相关性调查研究中发挥过重要作用。始于20世纪70年代的核酸分析技术是分子流行病学研究的主要手段,历经了对病原体遗传物质从条带、带型、序列特征分析的变迁,不仅快速、敏感、准确、可重复性高,也可从理论和实践上完整描述...
1《中国病原生物学杂志》系由国家卫生健康委员会主管,中华预防医学会、山东省寄生虫病防治研究所主办的学术性期刊,其前身为《中国寄生虫病防治杂志》,自2006起更名为《中国病原生物学杂志》。本刊以从事病原生物学教学、科研、流行病学、临床医疗,实验室诊断等各类专业技术人员为主要读者对象,及时报道病原生物学及其相关领域内的先进科研成果...
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