目的:研究白杨素(CR)体外对人类免疫缺陷病毒(HIV-1)感染和复制的影响及对植物血凝素(PHA)刺激的正常人外周血CD4^+T细胞活化的影响.方法:以CR对Calcein-AM标记的慢性感染HIV-1ⅢB的H9细胞(H9/HIV-1ⅢB)和MT-2细胞的融合、对HIV-1诱导的MT-2细胞形成合胞体及对感染HIV-1的MT-2细胞产生p24抗原的影响,探讨其抗HIV-1活性;以PHA刺激人外...
目的:观察IL-12和IL-18基因免疫对HBcAg核酸疫苗诱导小鼠(H-2d)特异性体液免疫和细胞免疫应答的影响.方法:用肌肉注射法将HBV核心区DNA疫苗、IL-12质粒和IL-18 质粒接种BALB/c小鼠;ELISA法检测小鼠血清抗-HBc(IgG)及IgG亚类(IgG1、IgG2a);LDH释放法检测小鼠脾细胞HBcAg特异性CTL活性.结果:免疫6周后,HBcAg DNA疫苗联合IL-12质粒、IL-18...
目的:建立表达重组糖蛋白Ibα活性片段(rGPIbαH1-V289)细胞株,并且纯化其表达产物,研究其生物学功能.方法:利用脂质体将含有编码GPIbαH1-V289 的DNA质粒pCMV3转染CHO细胞.用亲和层析法纯化重组片段.用SDS-PAGE和Western blot鉴定纯化产品的纯度和免疫学活性.用血小板聚集法检测纯化产品对瑞斯托霉素诱导血小板聚集功能的影响.用ELISA测定纯化...
目的:研究携带编码人天然颗粒溶素(GLS)和小鼠IL-12基因质粒(pZM03)偶联重组耻垢分枝杆菌(ATCC607)经鼻黏膜免疫小鼠后,小鼠体内的免疫状况.方法:BALB/c小鼠36只,随机分为生理盐水、pZM03、ATCC607、卡介苗(BCG)、重组ATCC607(即携带pZM03的ATCC607)、灭活重组ATCC607组;采用滴鼻法免疫小鼠,BCG组0、14天各1次,其它组0、4、14天各1...
目的:检测幽门螺杆菌标准菌株NCTC11637及临床分离菌株Hp1和Hp2的oipA基因,分析其核苷酸序列,比对其与国际标准菌株Hp 26695的同源性.方法:常规方法培养幽门螺杆菌,提取DNA,PCR法扩增oipA基因,检测其核苷酸序列,并比较其与Hp 26695的同源性.结果:NCTC11637及Hp1、Hp2均表达oipA基因.其核苷酸序列与Hp 26695比对,NCTC11637有48个突变位点、Hp1...
目的:观察抗死亡受体5(Death receptor 5,DR5)单克隆抗体--mDRA-6与顺铂(DDP)对HL-60细胞的协同杀伤作用.方法:DR5蛋白免疫BALB/c小鼠,融合筛选抗DR5杂交瘤细胞,制备抗DR5单抗--mDRA-6;流式细胞术测定顺铂对HL-60细胞表面DR5表达及细胞凋亡率;荧光显微镜下观察mDRA-6与顺铂协同作用下HL-60细胞形态变化;MTT法测定不同浓度的顺铂与mDRA-6对...
目的:培养人骨髓间充质干细胞(Human mesenchymal stem cell,hMSCs),探讨hMSCs体外向心肌细胞(Cardiomyocytes, CM)定向诱导分化的实验研究.方法:取人的骨髓血,用Percoll(1.073 g/ml)密度梯度离心及贴壁筛选结合的方法体外培养扩增hMSCs,并进行流式细胞仪分析鉴定其免疫学表型,以未加一抗只加二抗的hMSCs作为平行对照组.选用生长良好、...
CD4^+CD25^+调节性T细胞在肿瘤免疫耐受机制中发挥的作用近来备受瞩目,多种肿瘤患者机体内外周血及肿瘤局部均有调节性T细胞的比例增高.TGF-β1是很强的免疫抑制因子,它能影响参与天然免疫和获得性免疫免疫细胞的增殖、活化和分化,抑制免疫调节性细胞因子的产生.在肺癌病变局部,TGF-β1是否在淋巴细胞被诱导分化为CD4^+CD25^+调节性T细胞过程...
目的:探讨MHC-Ⅰ类相关链基因A(MHC class-Ⅰ chain related gene A, MICA)与湖南地区白血病之间的相关性.方法:应用荧光聚合酶链反应-基因扫描技术和聚合酶链反应-序列特异性引物技术分析,对62例白血病患者和112名正常人群进行MICA基因第5外显子微卫星等位基因分型及MICA基因缺失检测.结果:慢性粒细胞白血病组(n=35)的MICA·A5基因频率显...
目的:研究HLA-DRB1等位基因多态性与我国汉族溃疡性结肠炎遗传易感的相关性,并分析其与疾病临床分型的相关性.方法:应用基因芯片技术分析了本地区汉族溃疡性结肠炎60例患者和健康对照者DRB1的基因分型,采用Fisher's精确概率法比较了两组各位点等位基因频率分布的差异.结果:溃疡性结肠炎患者DR2和DRB1·15基因表达频率分别为45%和41.7%,较对照...
目的:研究板蓝根多糖对猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫猪T细胞亚群及抗体的影响.方法:以板蓝根多糖作为免疫增强剂联合猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗免疫仔猪,通过流式细胞仪检测猪外周血CD3^+、CD4^+、CD8^+细胞百分数,并用ELISA法检测猪血清中抗猪繁殖障碍与呼吸道综合征病毒抗体水平.结果:板蓝根多糖能显著提高仔猪的CD3^+、CD8^+淋巴...
目的:探讨galectin-3在子宫内膜异位症(内异症)患者在位子宫内膜中的表达及意义.方法:分别采用免疫组化和实时定量逆转录-聚合酶链反应(Real-time RT-PCR)检测内异症患者在位内膜及正常对照中galectin-3蛋白及mRNA的表达,比较其表达差异.结果:galectin-3蛋白定位于子宫内膜的腔上皮细胞、腺上皮细胞和间质细胞.与正常对照相比,galectin-3...
目的:制备抗抗CD3 ScFv单克隆抗体并研究其生物活性.方法:分离纯化后的抗CD3 ScFv蛋白免疫BALB/c小鼠,采用传统杂交瘤技术制备抗抗CD3 ScFv单克隆抗体;采用ELISA和Western blot鉴定其亚类和抗原结合特异性;采用FACS测定抗抗CD3 ScFv单克隆抗体对Jurkat细胞特异活性.结果:成功筛选出一株能稳定分泌抗抗CD3 ScFv单克隆抗体的杂交瘤细胞株(10B7...
辽宁省免疫学会成立暨第一届会员代表大会于2007年1月15日在沈阳召开。辽宁省副省长滕卫平、中国免疫学会理事长曹雪涛院士、中国免疫学会秘书长何维教授、中国医科大学校长赵群出会并讲话,省民政厅、卫生厅、辽宁省医学会等有关方面领导出会。会议选举吕昌龙为辽宁省免疫学会理事长;曹雅明、刘辉、关洪全、李铁民、余宪为副理事长;选举单风...
目的:探讨获取较高纯度和活性人表皮朗格汉斯细胞(Langerhans cell, LC)的实验方法,并观察分选所获人表皮LC接受免疫调节剂咪喹莫特刺激后细胞因子mRNA表达的变化.方法:联合采用密度梯度离心和免疫磁珠的方法分离纯化人表皮LC,将分选后的细胞用结合有FITC的鼠抗人CD1a单抗标记,经流式细胞仪检测LC纯化率,采用0.4%台盼蓝染色检测细胞的活性....
目的:表达和纯化鼠源性的α-1,3-半乳糖基转移酶的催化结构域(α1,3 GTcd)以及为在肿瘤细胞表面生成α-gal表位提供了可行性手段.方法:利用pET-15b载体以可溶性形式表达鼠源性α1,3 GTcd.利用高效液相色谱阴离子交换柱检测酶的活性.结果:①成功地构建了带有His-tag的α1,3GTcd重组质粒.②可溶性高效表达与纯化了带有His-tag的α1,3GTcd.③利用HPL...
目的:通过建立荧光定量RT-PCR的方法,检测颗粒溶素(Granulysin,GNLY)mRNA在人外周血单个核细胞(PBMCs)中基因表达的水平.方法:基于TaqMan荧光探针技术,构建克隆载体pMD18-T-GNLY,建立荧光定量RT-PCR方法,并检测了40名正常健康献血者外周血中GNLY的表达水平.结果:内参18 S rRNA的动态检测范围为10^3~10^8拷贝/μg RNA;而40名正常健康人外...
目的:了解慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)患者外周血CD4^+和CD8^+T细胞中TCR Vβ亚家族T细胞的基因表达和克隆性.方法:利用RT-PCR分别扩增19例CML-CP患者外周血单个核细胞(PBMCs)、CD4^+和CD8^+细胞TCR Vβ亚家族基因的CDR3,阳性产物进一步经基因扫描分析其克隆性.结果:CML患者外周血CD4^+和CD8^+细胞分别表达部分(1~21个)Vβ亚家...
目的:探讨中性粒细胞表面标志物CD64在早产儿感染中的诊断价值.方法:对新生儿科(包括NICU)109例患儿于流式细胞仪进行CD64水平的测定,并与C反应蛋白(CRP)(免疫比浊法检测)及IL-6(双抗体夹心ELISA法检测)进行比较,分早产儿感染组30例﹑足月儿感染组28例、早产儿非感染组25例和足月儿非感染组26例4组进行分析.结果:早产儿感染组CD64为...
目的:探讨孕妇及胎儿Rh(D/E)血型不合的免疫性溶血病的治疗,预防孕妇早孕自然流产或不足月死胎.方法:用大量去除血浆和换血疗法对孕妇及胎儿或新生儿Rh(D/E)血型不合者进行治疗,以降低IgG抗D/E的含量,提高胎儿或新生儿的成活率.结果:2例孕妇及胎儿Rh(D)血型不合者去除血浆前IgG抗-D分别为512和1 024,去除血浆3周后,IgG抗-D效价降至16和...
目的:探讨系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)患者CD4^+T细胞上共刺激分子CD137的表达及其作用机制.方法:应用流式细胞术检测30例系统性红斑狼疮患者和20例正常对照者外周血T细胞活化前后CD137的表达.结果:活动期SLE患者CD4^+ T细胞表达的CD137明显高于稳定期及正常对照组(表达百分率分别为21.56±4.08、3.01±0.09和1.24±...
随着我国经济体制改革的不断深入,高等教育的社会需求发生了重大变化,对高等医学教育提出了更新更高的要求.中华医学会会长钟南山院士提出,合格的医学学生应具备五种特性:学习上的自主性,工作上的创造性,对病人的责任性,对集体的合群性以及对社会的适应性.因此要培养符合21世纪高质量人才要求的医疗人员,必须深化医学教育改革,探索素质教育新思...
为适应经济全球化、科学技术国际化的挑战,培养适应未来社会及科技发展需要的高素质人才,双语教学是必然选择.国家教育部于2001年秋季发出通知,要求各高校大力推广使用外语讲授公共课和专业课,并提出要用开出多少完善的双语课作为衡量大学教学水平的重要尺度.我们教研室在吉林大学 “关于实施双语教学课程建设,积极推进双语教学的意见”的积极倡...
免疫学是生命科学和医学中的前沿科学,免疫学发展水平是反映一个国家综合科学实力及发展水平的指标之一.从学科广度上看,免疫学已渗透到基础医学和临床医学的许多领域,形成各分支学科和交叉学科,已成为医科院校所开设课程中的一门重要基础课.为了提供更为有效的免疫学教学,结合我院设有临床医学、检验、药学、影像等多个不同专业教学的现状,对实...
1型糖尿病(Type 1 diabetes,T1D)是由于自身反应性T细胞持续活化并破坏胰岛β细胞,使胰岛素分泌功能受损引发的代谢紊乱综合征,属于自身免疫性疾病.在T细胞发育过程中,胸腺可通过阴性选择消除自身反应性T细胞克隆,从而避免自身免疫应答的发生,此即中枢耐受机制.然而,一些自身反应性T细胞能够逃避阴性选择,识别外周组织抗原,从而引起自身免疫病....
过敏毒素C5a是补体系统活化产物,也可由一些嗜菌性细胞产生,它是炎症反应的重要介质和趋化因子,在急性肺损伤(ALI)、脓毒血症、脑膜炎、风湿性关节炎、肾小球肾炎等病理发生过程中起重要作用.因此,无论直接针对C5a本身,还是针对C5a与其受体相互作用位点而展开的研究都有重要意义,最具临床应用价值的莫过于寻找、鉴定新型的C5a抑制剂.近年来,具...