目的探讨HIV-l中国株CN54 Gag P55和P24重组蛋白的高效表达并纯化,为研究HIV疫苗和诊断试剂创造条件.方法分别将CN54 Gag P55和P24基因克隆至pBV220和pThioHisC载体,构建非融合表达载体;将重组质粒转化大肠杆菌BL21 codonplus-RIL,对工程菌进行诱导表达.Western-B1ot检测目的蛋白,用DEAE-Separose FF阴离子交换层析柱纯化目的蛋白;纯化的P55和P2...
目的建立人外周血自然杀伤T细胞(NKT)体外扩增及检测NKT细胞所分泌的细胞因子的方法.方法分别采用单加α半乳糖神经酰胺(α-Galcer组),单加树突状细胞(DC组)以及同时加α-Galcer、DC(α-Galcer、DC组)的方法从人外周血单个核细胞(PBMC)和纯化T淋巴细胞中扩增TCRVα24+/TCRVβ11+NKT细胞.采用细胞内细胞因子流式细胞术检测手段测定NKT细胞中IL-4,IFN-γ...
目的探讨亚甲蓝/光化学法对血浆中IgG的影响,评价含SARS抗体的病毒灭活血浆临床应用的可行性.方法将不同浓度的亚甲蓝分别加入人血浆中,经JY-I型血浆病毒灭活仪处理后,用Native-PAGE和SDSPA(GE测定IgG含量、亚基数目和分子量,用Western-blot检测其抗原性.结果经亚甲蓝/光化学法处理后血浆的IgG含量、亚基数目、分子量和抗原性均未见变化.结论亚...
目的寻求一种能有效提高冰冻干燥(简称冻干)保存后人红细胞回收率的再水化体系.方法测定10%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、6%羟乙淀粉(HES)、5%羧甲基淀粉钠(CMS)、生理盐水、0.75mol/L葡萄糖、等渗缓冲液及高渗缓冲液(5×Buffer)的晶体渗透压和胶体渗透压;将浓缩红细胞和保护液混匀,预冻后移入冻干机内作冻干处理,冻干完毕后,用不同种类或不同温度的再水...
目的探讨TT病毒(TTV)在输血过程中的传播及其致病性.方法常规酚-氯仿法抽提血清病毒DNA,设计位干TTVORFl保守区的两对引物.套式PCR扩增病毒DNA.ELISA检测血清HBsAg、抗-HAV、抗-HCV和抗-HIV.结果健康献血者血清中TTV-DNA检出率为43.1%(96/223).受血者输血TTV-DNA阳性血后2周,血清TTV-DNA转阳率为63.6%(14/22).8周血清TTC-DNA阳性率仍为46.4%(10/...
目的观察异基因外周血干细胞移植(Allo-PBSCT)粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员对健康供者血液系统的近期影响及毒副作用.方法对753例次健康供者G-CSF动员后的毒副作用进行临床观察和对50例Al-lo-PBSCT健康供者G-CSF动员前、采集前、采集后分别进行相关血液分析.结果少数供者有不同程度的头痛、低热等综合症,停用G-CSF后症状消失.G-CSF动员后第5天...
目的寻找一种快速、简便、敏感的放散试验方法.方法分别用氯仿和传统加热、乙醚法对13例被1gG和IgM血型抗体同时致敏的红细胞进行放散试验,检测放散液中红细胞抗体效价.结果在3种放散方法中,氯仿法不仅所获的放散液量多、颜色浅而透明,而且敏感性也不低.结论氯仿法放散试验操作简便快速,安全(试剂不易燃烧),且可同时放散出吸附在红细胞上的IgG和...
目的摸索建立一种简单实用的红细胞抗体检测技术.方法采用一种新的固相红细胞方法,把筛选红细胞固定于96孔 U型板.分别用固相法和试管法,对多种抗血清、供血者、有免疫史的病人3批标本检测,对结果加以比较.结果对抗血清的效价测定,两种方法结果一致;在对供血者和病人的检测中,固相法检出了所有试管法能检出的抗体.结论与试管法比较,固相法的灵敏...
目的为简化冰冻红细胞的制备程序,保证临床及时用血.方法比较不同条件制备的成品冰冻红细胞的红细胞回收率、溶血率、上清游离血红蛋白及体外溶血试验.结果红细胞冰冻前在4℃贮存1～6d与7～12d、甘油化红细胞先冰冻待解冻后再去甘油与先去甘油再冰冻、洗涤时加不同量的9%氯化钠溶液所制备的成品冰冻红细胞的红细胞回收率、溶血率、上清游离血红...
目的探讨样本保存时间和温度对抗-HIV ELISA检测结果有无影响.方法对21896份标本进行初、复检,对26份抗-HIV ELISA阳性标本分别在不同保存温度、不同时间再次进行检测,对前后结果不一致的13份进行确证. 结果初、复检,ELISA抗-HIV阳性97份,确证2份阳性.同时发现,随着保存时间增加抗-HIV效价降低,样本保存温度2～6℃,其HIV-Ab稳定性差.结论样本应...
目的建立一套RSP加高粘稠度稀释液的液体模式,解决RSP加高粘稠度稀释液不准的缺点.方法采用正交试验的方法对RSP加样器的液体参数进行优选.结果吸液速度、吸液延迟时间、系统气隙、拖尾气隙、过量体积、附加体积、吸液位置、返针位置、分配液体速度、每次加液后吸入气隙优选结果依次为:80μl/s、500ms、10μl、10μl、200μl、100μl、10mm、-10mm、4...
目的比较不同采血流程ALT检测结果不合格情况,寻求更佳的采血流程.方法汇总本站1998～2000年8月124363人次的无偿献血采血及检验记录,分析先采后检(先经快速检测ALT合格后采血,再作2次全项检测),先检后采(对献血者血液小样全项检测合格后采血,再全项复检)两种采血流程的检测结果及其不合格原因中ALT所占的比例.结果不合格率,先采后检组为4.8%(48...
目的考察应用快速全血生化分析仪检测ALT,对献血者进行快速初筛,以降低采血后ALT单项不合格率,减少报废血液效果.方法抽取采回站内的血标本900份,分别用快速全血生化分析仪和赖氏法进行检测.结果两种方法差异无显著,快速全血生化分析仪检测ALT所得结果与赖氏法结果基本符合.结论快速全血生化分析仪能准确、快速地检测ALT.
目的了解全血标本ALT活性测定值在贮存过程中的变化规律.方法将献血者全血标本分别置于30、20、4℃保存,分别放置0、8、24、48、72、96、120、144、168h后离心,检测ALT活性.结果在3种血样保存可能存在的常规工作温度条件下,ALT在8～1 2h都有轻微的下降,24h有升高的趋势,特别是在20℃和30℃放置的血样在72h后大幅度升高.在96h溶血已经非常明显,再...
目的评价第3代双抗原夹心法抗-HIV试剂盒的质量.方法应用抗-HIV参考品血清盘和临界值质控血清对所购进的第3代双抗原夹心法抗-HIV试剂盒进行应用评价.结果6家试剂的灵敏度、阴性符合率、阳性符合率、总符合率存有差别,个别厂家试剂存在阳性样本漏检或有假阴性样本出现,6个厂家的试剂均有最低检出限量样本未检出.结论试剂使用前进行质量抽检,综合...
目的比较国产金标试剂检测HBsAg差异,以期进一步提高检测质量.方法利用国内4个厂家的金标试剂检测HBsAg定值血清、阴性混合血清,考察试剂的敏感性、特异性及试剂条渗透速度和均一性.结果4种试剂检测HBsAg特异性均可达到100%,但试剂的灵敏度、渗透速度和均一性均存在不同的差异.结论针对国产金标试剂的质量差异,初步建立了室内质控,对提高检测质...
目的探讨优化机采血小板的操作,观察全血处理量与采前血小板计数之间的关系.方法直接使用机器系统操作默认设置的参数处理全血量及循环次数;在机采前将供者血小板计数输入血细胞分离机的程序中,机器自动提示所需处理全血量及循环次数.结果采前输入供者血小板计数可以明显地提高最终产品中血小板的含量.结论供者采前血小板计数与机采血小板的全血...
目的探计机器采集血小板的2U质量及其对供者安全性的影响.方法用MCS(R)+血细胞分离机采集血小板2U后,收集供者采后抗凝全血1ml检测血常规,收集机采血小板成品lml(原液)作血小板计数.结果①机采血小板终成品计数检测≥2.5×1011/ U达87.3%.②所有被检测的供者采后血小板平均计数160×109/L.结论对身体健康、采前Plt≥250×109/L、体重＞55kg的供者机...
目的对血站贮血冰箱温度自动监控和记录.方法将巡检温度仪配以相应的输出设备(打印机、电脑),根据其与各冰箱的距离作热电偶加工:一端做感温探头置于各冰箱中,另一端连接巡检仪;设定相关的温度参数.结果实现了对多台贮血冰箱的自动监控与记录,可评估冰箱温度,自动分析冰箱内的血液温度.结论该装置可确保贮血冰箱温度记录的真实性和有效性.
目的观察去白细胞输血对急性白血病患者细胞免疫功能的影响.方法将61名化疗期间需要接受输血的急性白血病患者随机分为两组:观察组30例,接受去白细胞输血;对照组31例接受常规输血,两组患者的化疗方案基本相同.对两组治疗前后的T细胞亚群、NK细胞活性及红细胞C3b受体花环率(RBC-C3bR)检测并作统计学处理.结果两组患者的细胞免疫功能在治疗前无显...
目的了解本地区新生儿发生高胆红素血症的主要病因.方法按全国临床检验操作规程,对出生后1周内发生高胆红素血症的279名患儿做葡萄糖6磷酸脱氢酶(G6PD)定量测定和HDN血型血清学检验.结果在279名患儿中,G6PD缺乏的有52名(18.64%),G6PD缺乏的男性患儿显著多于女性(X2=4.41 P＜0.05);母子ABO血型不合的HDN有77名(27.6%),母/子血型O/A(B)二种组合的...
目的观察新鲜冰冻血浆制作冷沉淀后的上清液(冷上清)治疗血栓性血小板减少性紫癜(TTP)的临床效果.方法用冷上清作置换液,对患者作血浆置换,置换后症状缓解,继续以冷上清输注,配合激素、免疫抑制剂、抗血小板聚集药物治疗.结果10名患者中,9名备置换3～6次,1名因反复发作3次,共置换10次;8名治愈,2名死亡.结论应用冷上清作置换液血浆置换治疗TTP,与...
目的探讨凝血酶原前体蛋白(PIVKA-Ⅱ)在华法令抗凝治疗监测中的意义.方法采用ELISA法测定55例心脏瓣膜替换术后口服华法令抗凝监测患者和25名正常对照者血浆中PIVKA-Ⅱ含量,同时测定凝血酶原时间(PT)和凝血因子Ⅱ活性,比较华法令治疗组与正常对照组PIVKA-Ⅱ血浆含量、PT及因子Ⅱ活性的相关性.结果华法令组病人血浆中PIVKA-Ⅱ含量明显高于正常对...
目的观察预存式白体输血在手术应用后患者的恢复情况,为自体输血的可行性提供依据.方法选择骨科择期手术100例,实验组50例,采用自体输血,术前采血200～1000ml,对照组输异体血,两组患者采血前后及输血前后检测各项血液指标.结果实验组采血前后各项血液指标无明显差异(P＞0.05).实验组与对照组输血前后检测血液指标,除对照组血小板计数输血前后有...
目的应用血浆置换术治疗急症中毒性疾病.方法用血细胞分离机,采用间断性血浆单采技术,同时输注相应置换液.结果抢救重度中毒病人93例,成功率98.92%.结论PE治疗抢救重症中毒急症与置换量和治疗时间有直接效果关系.置换量大,治疗时间短,成功率高.是抢救重症中毒急症的有效方法.
为了使输血传播艾滋病的危险降到最低限度,有必要提高采供血机构对抗HIV的检测能力.为此浙江省血液质量管理委员会委托本实验室制备和发放抗-HIV室间质控血清,对本省采供血机构抗-HIV的检测情况进行评估,现将2年来室间质量评价的结果报告如下.
为了便于公民无偿献血和减少血液浪费,各采供血机构普遍采用快速金标法对献血者初筛HBAg[1,2].目前,西安市街头二次以上无偿献血人数呈递增态势,但采用快速金标法对二次以上无偿献血者初筛HBsAg的必要性尚无讨论,笔者对此作了调查分析,以利于二次以上无偿献血工作.
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