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新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体制备及其鉴定

戚玲玲 卢韵碧 史文珍 赵春贞 张咏梅 陈丽萍 张丽慧 方三华 鲍建芳 沈建根 魏尔清 浙江大学学报·医学版 2009年第04期

摘要:目的:制备新型半胱氨酰白三烯受体GPR17的多克隆抗体(pAb),并鉴定其免疫学特性。方法:以KLH偶联的GPR17多肽免疫家兔制备其pAb,用间接ELISA法测定抗体效价,阻断ELISA测定抗体敏感性及特异性,同时以新制备的抗体做Westernblot,检测GPR17的组织表达。结果:通过免疫家兔获得的抗GPR17pAb,ELISA测定显示其抗体效价最高可达到1/16364,并对CysLT1受体和CysLT2受体基本无交叉反应,具有较好的特异性。Westernblot结果显示,GPR17在大鼠脑和心脏组织中有较高的表达,其分子量在43kD左右。结论:制备的GPR17pAb具有较高的效价和较好的特异性,能满足Westernblot检测GPR17的要求。

关键词:受体白三烯半胱氨酸gpr17半胱氨酰白三烯受体

单位:浙江大学医学院药理学系 浙江杭州310058 衢州学院医学院药理学教研室 浙江衢州324000 杭州师范大学基础医学院药理学教研室 浙江杭州310036 浙江大学医学院免疫研究所 浙江杭州310058

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