Cre／loxP位点特异性重组系统自发现以来，在植物基因重组领域得到了广泛应用，已成为提高转基因植物安全性的有效方法。本文介绍了该系统的基本概况及其在转基因植物表达载体构建方面的应用，尤其是在基因删除、定点整合、多基因表达以及杂种优势利用等方面的应用做了重点阐述。
籽粒硬度是重要的小麦品质性状之一，对小麦的磨粉品质和加工品质有重要影响。控制籽粒硬度的主效基因puroindoline位于5D染色体的短臂上，可分为Pina和Pinb2种类型。Pina和Pinb紧密连锁，编码区均为447个碱基，没有内含子，共同形成小麦籽粒硬度的分子遗传基础。目前，普通小麦和山羊草中均已发现多种puroindoline变异类型，其中引起小麦籽粒硬...
【目的]克隆棉花木质素合成关键酶基因GhCOMT1、GhCOMT2和GhCOMT3全长cDNA序列，分析其在不同组织部位的表达情况并进行原核表达研究。【方法】根据棉花纤维特异表达cDNA文库分析得到的EST序列设计引物，采用RT-PCR技术克隆基因，用生物信息学方法对获得的cDNA序列及推定的氨基酸序列进行分析。采用半定量RT—PCR方法研究6hCOMT1、GhCOMT2和GhCO...
【目的】研制适应性广的不同类型水稻成熟胚再生技术。【方法】采用生产上应用价值高的不同类型水稻品种成熟胚为外植体材料，比较研究9个粳稻、9个籼稻和11个新近培育的超级杂交稻（两系或三系）或优势组合在不同培养基中的出愈、分化和再生等组织培养力表现。【结果】以M8为基本培养基，在添加30g·L^-1蔗糖、8g·L^-1琼脂和2mg·L^-12，4-D（2，...
【目的】明确中国玉米生产的主要限制因素和技术发展优先领域。【方法】采用参与式方法，对中国主产省和东北春玉米、黄淮海春、夏播玉米和西南山地玉米三大主产区生产限制因素进行评估，并基于限制因素影响程度、解决的可能性评估，建立玉米生产技术优先序。【结果]当前限制中国玉米产量潜力实现的主要因素：一是以耕作栽培管理粗放、施肥方法...
【目的】了解59份美国西北部小麦品种（系）对中国当前条锈菌流行小种的抗性水平，分析其抗病基因的存在情况，为培育中国抗条锈病新品种提供资源和依据。【方法】选用中国小麦条锈菌优势小种条中31号、条中32号和条中33号对大部分具有高温成株抗性的美国59份小麦品种（系）苗期及成株期进行抗性接种鉴定，利用-9当前有效的金生育期抗性基因Yr10...
【目的]探讨好气与淹水处理间水稻土有机碳矿化量差异的变化特征。【方法]采集江苏省常熟市全市范围的代表性水稻土样品并布置室内好气与淹水处理的恒温培育试验，观测土壤有机碳矿化的动态过程及矿化量变化，比较分析不同水分状况处理的土壤有机碳矿化量差异及形成机制。【结果】培养过程中不同水分状况处理下土壤有机碳日均矿化量变化趋势有显...
【目的】揭示长期不同培肥处理对黄土高原南部土垫旱耕人为土（[土娄]土）土壤有机氮组分、氮素矿化的影响以及有机氮组分对氮素矿化潜力的贡献。【方法】采用Stanford和Smith间歇淋洗好气培养法测定了[土娄]土19年长期不同施肥处理土壤矿化氮的数量，并采用Bremner法测定了培养前、后土壤有机氮各组分含量的变化。【结果】各处理土壤有机氮各组...
【目的】探讨钙施用时期对提高番茄耐盐性的作用。【方法】以番茄辽园多丽为材料，研究不同时期（提前3d、同时、延后3d）营养液增施Ca^2＋（10mmol．L^-1）对NaCl（100mmol．L^-1）胁迫下番茄幼苗的生物量、外渗电导率、相对含水量、脯氨酸含量、可溶性糖含量、丙二醛含量、Ca^2＋-ATPase活性的影响，探讨Ca^2＋对盐胁迫伤害的缓解作用。【结果...
【目的】分析苹果叶片的高光谱特征，探索建立苹果叶片色素含量的高光谱监测模型，以促进高光谱技术在苹果长势监测中的应用。【方法】通过方差分析方法，分析苹果春梢和秋梢停止生长两个时期功能叶片的不同部位、不同含水率、不同品种的高光谱特征。利用相关分析方法，研究高光谱参数与叶片色素含量间的关系，并建立基于光谱参数的叶片色素含量...
【目的】调查云南主要野生食用菌中砷（As）、镉（Cd）、汞（Hg）、铅（Pb）的背景值，研究不同种类野生食用菌的重金属富集规律，为野生食用菌食品安全评估提供科学依据。【方法】在云南省25个县采集茶褐牛肝菌（Boletus brunnelssimus）、皱皮疣柄牛肝菌（Bolctus duriusculus）、美味牛肝菌（Boletus edulis）、白牛肝菌（Boletus granulatus...
【目的】明确面粉特性对饺子皮品质的影响，为改良饺子皮品质提供理论依据。【方法】选用中国和加拿大小麦品种及澳大利亚和美国商业小麦及中国商业面粉共计15份样品，进行面粉理化指标、直链淀粉含量、快速黏度仪（RVA）等参数测定，并对饺子皮品质进行感官评价。【结果】形成时间、稳定时间、拉伸面积等参数与生饺子皮色泽呈显著正相关（r分别...
【目的】探讨1-MCP和DPA对砀山酥梨黑皮病的抑制效果及其可能的机理，为梨的黑皮病控制提供技术参考和理论依据。【方法】以砀山酥梨为材料，在果实冷藏（2±0．5℃）前，分别采用1000μL．L^-1、2000μL．L^-1的DPA溶液浸泡1min和0．5μL．L^-1的1-MCP气体处理12h，定期对果实部分采后生理指标进行测定，并在贮藏末期对其黑皮病发病情况进行观察统...
【目的】本试验旨在研究哺乳期母猪蛋白限饲对子代血脂水平、肌内脂肪含量及H-FABP基因表达的影响。【方法】选取胎次、体重相近（180±5kg）、经同期纯种繁育的民猪及长白猪妊娠母猪12头（民猪和长白猪各6头）。将每个品种母猪随机分为2组，每组3个重复，每个重复1头母猪。供试母猪妊娠期营养水平相同，哺乳期对照组日粮蛋白水平为18％，限饲组...
【目的】构建一株表达H3N2亚型猪流感病毒（SIV）HA基因的复制缺陷型重组腺病毒，并测定其对小鼠的免疫效力。【方法】以含有SIVA／swine／Guangdong／9／2005（H3N2）HA基因的重组质粒pMD18-H3HA为模板，利用带特定酶切位点的引物PCR扩增HA基因，将其亚克隆入质粒plRES2-EGFP中，再次将含有H3HA及EGFP的基因片段克隆到腺病毒的穿梭质粒pDC315，...
【目的】建立合成多肽抗原检测FMDNSP抗体的ELISA方法。【方法】固相法合成特异性FMDVNSPB细胞表位肽，将其偶联在BSA载体蛋白上，作为抗原包被在ELISA板上，制备检测抗FMDVNSP抗体的ELISA试剂盒，并对该试剂盒进行方法考核。【结果】抗原包被浓度选择2．5ug·mL^-1检测I99份血清标本，与美国UBI商品试剂盒符合率达到96．48％，与国产3ABCELISA比...
【目的】探讨复方益母生化散对奶牛子宫内膜炎的作用机理。【方法】体外实验：分离奶牛子宫内膜细胞，细菌脂多糖（LPS）诱导子宫内膜细胞炎症模型，复方益母生化散处理子宫内膜炎症细胞48h、72h，Western blotting法检测CYP450的表达；体内实验：复方益母生化散栓剂治疗患有子宫内膜炎的奶牛，检测血清中IgG、IgA含量的变化。【结果】复方益母...
【目的】以白细胞介素-1β（Interleukin-1β，IL-1β）基因为候选基因，研究其单核苷酸多态性（Single nucleotide polymorphism，SNP），及其与部分免疫性状的关系。【方法】根据红色原鸡IL-1β基因序列设计引物一对，利用PCR-SSCP方法检测了如皋鸡、文昌鸡以及安卡鸡IL-1β基因内含子1、2的SNP，同时检测了56日龄的血清IL-1β度、异嗜性粒细胞／淋...
[目的】探索提高超级杂交稻库容量的氮素优化措施，对于提高氮肥利用效率和实现超级杂交稻养分高产高效具有重要现实意义。【方法】以具有代表性的超级杂交稻品种Y两优1号为材料，通过不同氮素施用量（基、穗施氮比例80：20下施氮量为0-270kg．hm^-1）与施用时期运筹（施氮量180kg-hm^-1下基、蘖、穗、粒不同施氮比例）的田间试验结合水稻主要生...
【目的】在大田环境下建立快速有效的大豆菌核病田间接种鉴定方法，为大豆抗菌核病育种服务。【方法】采用收集不同地区和寄主来源的菌核病分离物，经PDA培养基再生培养，再接种麦粒形成麦粒接种体，利用微创结合锡箔纸捆绑麦粒接种体的方法建立大豆菌核病田间接种鉴定方法。【结果】不同大豆种质间的病情指数和病斑长度存在显著差异，不同分离...
【目的】环介导等温扩增（100p—mediated isothermal amplification，LAMP）是一种特异、灵敏、快速的新型基因检测技术。本研究拟用该技术建立菊花中番茄不孕病毒（TAV）的检测方法。【方法】设计能识别TAV印序列6个特定区域的4种LAMP特异引物，对MgCl2、dNTPs、甜菜碱等LAMP反应条件进行优化，利用新建的LAMP法检测TAV，比较LAMP和RT—PCR2种...
【目的】分析雌雄同株黄瓜单性结实性的主基因＋多基因混合遗传特点，为选育强单性结实雌雄同株黄瓜品种提供理论依据。【方法】通过强单性结实雌雄同株黄瓜自交系‘6457’与非单性结实自交系‘6429’和‘6426’构建的6个世代群体，应用植物数量性状主基因＋多基因联合分离分析方法，分析不同遗传背景和季节雌雄同株黄瓜单性结实性遗传表现。【...
【目的】研究温汤处理种球对亚洲百合幼苗耐热性的影响。【方法】以亚洲百合‘多安娜’（Pollyanna）为试材，研究种球在45℃下，经历不同时间梯度（0、10、20、30、40、50min）温汤处理后，其幼苗抗性生理指标及电阻抗图谱参数对38℃胁迫的反应。【结果】种球热锻炼20min，植株S01）活性及可溶性糖含量分别高于对照51．41％（P〈0．01）和23．4...
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